مسابقات این مرحله در روزهای ۲۱ و ۲۲ اسفند  ۹۹ برگزار می شود. مسابقات مرحله یک هشتم و یک چهارم جام حذفی نیز در سال ۱۴۰۰ برگزار خواهد شد.


مسابقات مرحله یک شانزدهم به شرح زیر است:
آلومینیوم اراک - هوادارتهران 
 ذوب آهن - شهرخودرو
 نفت آبادان - داماش پارسه تهران
 نساجی مازندران - سایپا
ملوان بندرانزلی - ویستاتوربین
پیکان تهران- استقلال
 سپاهان- مس رفسنجان
استقلال‌ملاثانی- شاهین بندرعامری
نفت مسجد سلیمان - خیبرخرم آباد
گل گهر سیرجان - مس کرمان
تراکتور تبریز- شهرداری ماهشهر
شهرداری برد اسکن(تیمی از استان خراسان رضوی) - خوشه طلایی ساوه
مس نوین کرمان - پرسپولیس
پارس جنوبی- پاس همدان
 اتحاد کامیاران -قشقایی شیراز
ماشین سازی تبریز- فولاد خوزستان
اسامی تیم های میزبان در ابتدا آمده است.